琼脂糖电泳检测
检测项目
DNA片段分析:
- 片段大小范围:50-10000bp(参照ISO19238:2017)
- 迁移率测定:单位时间迁移距离(mm/s)
- 分辨率指数:相邻带分离度≥1.5
- 28S/18S比值:≥1.8(完整RNA标准)
- 降解带检测:无拖尾或弥散条带
- 荧光强度校准:标准曲线R²≥0.99
- 定量范围:1ng/μL-500ng/μL
- 蛋白质污染:无明显拖尾条带
- 盐离子影响:迁移偏移≤5%
- 标准带定位误差:±2%分子量
- 标记物线性范围:100-10000bp
- 电压梯度:5-10V/cm(最优8V/cm)
- 运行时间:30-90分钟
- 低浓度凝胶:0.5%-0.8%(大片段分离)
- 高浓度凝胶:1.5%-2.0%(小片段分离)
- TBE缓冲液pH:7.8-8.2
- TAE缓冲液导电率:1.5-2.0mS/cm
- EB染色灵敏度:DNA检测限1ng
- SYBRSafe荧光强度:线性范围5-100ng
- 带密度积分:相对丰度计算误差≤5%
- 片段比例测定:目标带占比≥95%
检测范围
1.PCR产物:扩增片段(100-3000bp),重点检测特异性条带和引物二聚体干扰
2.基因组DNA:高分子量片段(>10kbp),侧重降解评估和剪切效率验证
3.质粒DNA:超螺旋结构(5-15kbp),检测开环或线性化变异
4.RNA样品:总RNA或mRNA(0.1-10kb),聚焦28S/18S比值和降解指标
5.DNA限制酶切产物:酶切片段(200-5000bp),核查酶切完全性和片段大小匹配
6.cDNA文库:插入片段(0.5-5kb),评估文库完整性和背景噪声
7.微卫星标记产物:短串联重复(100-500bp),检测扩增特异性和等位基因大小
8.DNA测序片段:Sanger测序产物(300-1000bp),验证纯度和单一条带
9.病毒核酸:病毒基因组(1-50kb),侧重完整性检测和宿主DNA污染
10.环境DNA样品:混合DNA片段(100-5000bp),评估微生物多样性及PCR抑制剂影响
检测方法
国际标准:
- ISO19238:2017Nucleicacidseparationbyelectrophoresis
- ASTME2186-02JianCepracticefornucleicaciddetectionbygelelectrophoresis
- ISO22174:2005Molecularbiologyanalysisforfoodandfeed
- GB/T34797-2017DNA凝胶电泳检测方法
- GB/T35825-2018RNA完整性检测技术规范
- GB/T37870-2019核酸分子量标记校准规范
检测设备
1.水平电泳槽:模型A型(槽长20cm,样品孔数10-15)
2.直流电源:模型B型(电压范围1-300V,电流精度±1%)
3.UV透射仪:模型C型(波长302nm,检测灵敏度1ngDNA)
4.凝胶成像系统:模型D型(分辨率5M像素,CCD线性动态范围0-4OD)
5.微量移液器:模型E型(量程0.1-1000μL,误差±0.5%)
6.分析天平:模型F型(量程0.001g-200g,精度0.1mg)
7.微波炉:模型G型(功率800W,熔胶时间控制±10s)
8.恒温水浴:模型H型(温度范围20-100°C,稳定性±0.5°C)
9.离心机:模型I型(转速1000-15000rpm,RCF最大20000×g)
10.pH计:模型J型(测量范围0-14,精度±0.01)
11.紫外灯箱:模型K型(UV波长365nm,照射均匀度≥95%)
12.数字照相机:模型L型(ISO灵敏度100-3200,曝光时间0.1-30s)
13.计算机分析软件:模型M型(图像处理速度≤5s,带密度积分算法)
14.温度控制器:模型N型(控温范围4-40°C,波动±0.1°C)
15.安全防护设备:模型O型(UV屏蔽罩,透光率≤0.1%)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。